铜绿假单胞菌由于分离率高、耐药性广泛，其感染治疗困难、死亡率高．并时有暴发流行而成为医院感染和抗生素耐药的新热点，也是临床治疗的难点一 。近年来，由于第三代头孢菌素的大量应用，大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌甚至铜绿假单胞菌(pseudomonas aeruginosa，PA)都相继出现了超广谱 内酰胺酶(extended—spectrum 8一lactamases，ESBI s)菌株，此酶是革兰阴性菌对青霉素、头孢菌素及氨曲南等广谱8一内酰胺类抗生素耐药的主要机制。为了解本地区PA产ESBI S的阳性率及其对耐药性的影响．本文对I临床分离的109株PA进行ESBI S检测，并对其药敏结果进行分析。现报道如下。

资料与方法

1．菌株来源：lO9株PA均来自2001年1月～2004年12月本院住院患者送检的痰液、咽拭子、胆汁、尿液等标本，其中分离自痰液81株、胆汁l0株、尿液7株、脓液5株、分泌物3株、胸水2株、1株。

2．菌株鉴定及药敏试验：按《临床学操作规程》对标本接种培养，采用法国生物梅里埃公司API20NE鉴定系统鉴定到种．使用生物梅里埃公司ATB药敏试验板及配套试剂进行药敏试验。菌株铜绿假单胞菌ATCC27853来自四川省中心。

3．ESBI s测定：采用双纸片增效试验，为美国国家I临床标准化委员会(National Committee for Clinical I aborato—ry Standards，NCCLS)方法，即用灭菌棉棒蘸取0．5麦氏单位的PA 菌液，均匀涂抹MH 琼脂平板．10rain后贴头孢他定(30~g)、头孢他定／克拉维酸(30／l0／~g)、头孢塞肟(30I*g)、头他塞肟／克拉维酸(3O／lO／,g)纸片，35℃ 孵育l 6～ l8h，对两个q-任何一种药物，在加克拉维酸后，抑菌圈直径与不加克拉维酸的抑菌圈相比，增大值≥5mm时，划定为产ESBI S菌株。4，统计学处理：产ESBI S PA组与未产ESBI S PA组对抗

牛素耐药性之间的差别比较．采用Y 榆验。

结 果

1．产ESBI S PA组阳性率：在109株PA 中，共检出22株产ESBI S菌珠，总阳性率20．2 。

2．22株产ESBI S PA 组I临床分布特点：(1)标本分布：痰2o株，尿液、胸水各1株。(2)分离患者的基础疾病：术后肺部感染9例，恶性肿瘤6例，重症肺炎5例，慢性支气管炎急性发作2例。

3．PA对1 2种抗生素的耐药率：耐药率维持较低水平的抗生素有：多粘菌素E、泰能、阿米卡星、哌拉西林+他唑巴坦、替卡西林+棒酸、哌拉西林，为4．6 ～44．0 ，其余抗生素均有较高程度的耐药。产ESBI S PA 组和未产ESBI S PA 组耐药性相比，除多粘菌素E、复方新诺明、妥布霉素、泰能无显著性差异外(P>O．05)，其余均有显著性差异(P< o．05或P讨 论

ESBLs被定义为可水解oxyimino一头孢菌素的8内酰胺酶，可被克拉维酸抑制，位于功能基2be位置．其最早检出于克雷伯菌和大肠埃希菌等肠杆菌科细菌。由于耐药质粒的扩散，从肠杆菌科以外的细菌(如PA)中也可分离到ESBI S一 。近年来．国外产ESBI s P＼汹株不断增多。。本文应用双纸片增效试验来检测I 『术分离PA 菌株产ESBI S的阳性率，结果显示，ESBI S PA枪出率相当高(约2O．2 )，值得I临床关注。由于产酶株对抗生素的耐药性可以通过质粒在菌种和菌种间转移和传递，不但能赋予细菌以广泛的抗药性，而且能造成耐药

菌株播散，导致医院暴发流行，给I临床治疗和预防流行带来很大困难 。因此，I临床医生和微生物工作昔应重视ESBI S菌株的测定。

由表1得知，产ESBI s PA组与未产ESBI s PA组均对多粘菌素E、泰能敏感(P>O，05)，两组菌株对复方新诺明高度耐药，此系天然耐药所致。对包括替卡西林、替卡西林+棒酸、哌拉西林、哌拉西林+克拉维酸、环丙沙星在内的其余8种抗生素，产ESBI S PA 组的耐药率均明显高于未产ESBI S PA组(P<0．05或P<0．01)。由此可见，产ESBI S PA的多重耐药表1 产ESBI s PA组与末产ESBI s PA组的耐药率比较状况比未产ESBI S PA要严重得多。值得 提的是，替卡西林+棒酸、哌拉西林+克拉维酸是酶抑制剂复合抗牛素．是治疗产ESBI S PA菌株导致感染的可行方法。 由丧1可见．这两种抗生素对产酶组和未产酶组的耐药率却有显著性差异(P<0．05或P<0．01)。这说明是部分产ESBI PA还有其他酶与ESBI S造成混合感染所致．如AMPC酶、金属酶、其他 内酰胺酶等。所以．导致这类菌株不仅对青霉素、头孢菌素和氨曲南耐药．还对含p一内酰胺酶抑制剂的 一内酰噱类抗生素、头霉素耐药．甚至对碳青霉烯类抗生素耐药．本文就有3例， ESBIs PA同时对泰能耐药。产ESBI s PA不仪对G内酰胺炎抗生素有较强的耐药性，而且对氟喹诺酮类、氯基糖甙类也有很高的交叉耐药性。表1中显示了产ESBI s PA对环丙沙星、从大霉素较高的耐药率。显而易见．产ESBI sPA 的耐药机制更加复杂。

多粘菌素E虽对产ESBI s PA的敏感率较高．fH由于其肾毒性和神经毒性不良反应，临床较少使用；阿米 星是氨基糖甙类药物．一般不单独使用，且由于其耳、肾毒性．临床亦较少用；故泰能仍然是经验用药 选。但也应看到， 近年来对泰能耐药的菌株有增长趋势． 故治疗时应以抗生素敏感性试验为依据。由产酶株标本来源町见，产酶株主要分离于术后肺部感染、慢性呼吸道疾病及肿瘤患者的痰标本．这类患者往往住院时间长、基础疾病严重、有大量使用抗蔺药物史。提示应加强这类患者标本的产酶情况检测．并严格落实医院感染控制措施．加强有关科室的消毒监控．防止产酶侏的流行播散。