分析测试百科网

搜索

喜欢作者

微信支付微信支付
×

如何高效地感染原代细胞

2021.5.20
头像

xujinping

致力于为分析测试行业奉献终身

  原代细胞的感染一直是个麻烦的事情。把一个基因导入到细胞里,有4个常用的方法。

  1、质粒+转染试剂。质粒转到细胞里面是需要借助转染试剂才能进细胞的。普通细胞可以采用这种方法,但这种方法对原代细胞来说,转染效率不高。

  2、质粒+电转仪。电转的转染效率比加转染试剂的会高。只是电转仪比较少实验有,并且电转时候造成细胞膜损坏,细胞死亡率高。

  3、慢病毒。慢病毒容易包装,许多人会用来尝试感染,但大部分感染效率不会特别好。

  4、腺病毒,是感染原代细胞的好帮手。腺病毒有ad5和ad5F35两款。

  ad5:平常所说的普通腺病毒,它感染细胞是通过自己的纤突蛋白与细胞受体CAR结合来实现的。感染原代细胞能力比慢病毒高很多。

  Ad5F35:他跟ad5的区别是,受体结合位置的纤突(Fiber)改造成了Ad35型腺病毒的纤突。因此Ad5F35,其感染细胞受体从Ad5的CAR变成了CD46。CD46在绝大部分人源的细胞中都存在。在Ad5转导效率较低的CD34+细胞,比如造血系统细胞和干细胞上,Ad5F35也有非常好的感染效率。Ad5F35对造血系统细胞、干细胞、免疫细胞,感染效率都不错,例如DC细胞,jurkat细胞。

  结论:感染原代细胞首选腺病毒。

网络
仪器推荐
文章推荐