分析测试百科网

搜索

喜欢作者

微信支付微信支付
×

细菌室操作规程(十)

2021.5.21
头像

王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

弧菌属 
常规鉴定 
虽然弧菌属内包含的菌种较多,但临床实验室常见到12个菌种,其中具有明确致病作用的有霍乱弧菌、副溶血弧菌、河弧菌、拟态弧菌等。各种弧菌的鉴别特征见表5—3—36。 
弧菌的鉴定分两步,首先应与相近的菌属区别,定属后再做种的鉴定。 
 1. 与相似的菌属区别:弧菌属归弧菌科。同科中还有气单胞菌属和邻单胞菌属,均为氧化酶阳性,发酵型。弧菌属与其两者的区别可依嗜盐性、甘露醇、氨基酸及Ο/129(2,4-二氨基-6,7-二异丙基碟啶)敏感性等加以区别,参见表5—3—36。Ο/129试验用纸片浓度10μg、150μg二种,与纸片法药敏试验相同,出现抑菌环即判阳性(S)。 
 表5-3-36 弧菌科3个菌属特性的鉴别 
  
特 性 气单胞菌属 邻单胞菌属 弧菌属   
甘露醇   
鸟氨酸   
精氨酸   
嗜盐性   
Ο/129敏感   

2.霍乱弧菌的鉴定:目前我国临床细菌室对霍乱弧菌的鉴定一般只作初步鉴定,具体方法如下: 
(1)直接涂片 
悬滴检查:取患者粪便制成悬滴标本(亦可用压滴法),检查细菌的动力。霍乱弧菌无论是古典生物型或El-tor生物型均呈现极活泼的穿梭状运动。Ο1群霍乱多价血清制动试验阳性,可作早期推测性报告。 
表S-3-37 致病弧菌的生化特性(阳性百分率)  
  
试 验 霍乱弧菌 拟态弧菌 麦氏弧菌 霍利斯弧菌 海鱼弧菌 河弧菌 弗尼斯弧菌 溶藻弧菌 副溶血弧菌 致伤弧菌 辛辛那提弧菌 沙鱼弧菌   
精氨酸 
(1%NaCl) 0 0 60 0 95 93 100 0 0 0 0 0   
赖氨酸 
(1%NaCl) 99 100 35 0 50 0 0 99 100 99 57 100   
鸟氨酸 
(1%NaCl) 99 99 0 0 0 0 0 50 95 55 0 0   
葡萄糖产气 0 0 0 0 10 0 100 0 0 0 0 0   
麦芽糖 99 99 100 0 100 100 100 100 99 100 100 100   
甘露醇 99 99 96 0 0 97 100 100 100 45 100 50   
水杨苷 1 0 9 0 0 0 0 4 1 95 100 0   
蔗 糖 100 0 100 0 5 100 100 99 1 15 100 50   
氧化酶 100 100 0 100 95 100 100 100 100 100 100 100   
ONPG 94 90 50 0 0 40 35 0 5 75 86 0   
硝酸盐 99 100 0 100 100 100 100 100 100 100 100 100   
0%NaCl 100 100 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0   
8%NaCl 1 0 44 0 0 71 78 94 80 0 62 0   
Ο/129 99 95 90 40 90 31 0 19 20 98 25 100   
枸橼酸盐 97 99 75 0 0 93 100 1 3 75 21 0   

染色检查:取米泔样粪便的絮状物、粘液部分涂片2张,干燥后用乙醇固定,分别用革兰染色及1:10稀释的石炭酸复红染色,干燥后用油镜检查,观察有无革兰阴性、呈鱼群样排列的弧菌。涂片检查,只能对可疑患者作初步诊断参考,不能作确诊依据。 
(2)玻片凝集试验:自分离平板上挑取可疑菌与霍乱多价诊断血清(即Ο1群霍乱多价血清)做玻片凝集试验,所用血清的效价应在1:80~l:160之间,如过浓,则稀释后再作凝集。将稀释血清滴加在洁净的载玻片上,挑取可疑菌落混于血清内,即刻(一般不超过 10s)出现肉眼可见的明显凝集者为阳性。菌落应以生理盐水作对照,对照应不发生凝集。为了提高阳性检出率,应多挑可疑菌落进行玻片凝集试验。作初步鉴定试验后,将此高度疑似菌送卫生防疫站作最后鉴定。 
霍乱弧菌是重要病原菌。由于病原学及流行病学方面的需要,对Ο1群霍乱弧菌进一步分型是必要的。国际上公认通用的区分方法有两种:①生物分型;②抗原分型。 
生物分型:根据霍乱弧菌在生物学上的差异,分为两个生物型,命名为古典生物型和 El-tor生物型。古典生物型的毒力往往大于 El-tor生物型。古典生物型菌株的染色体上带有两个毒素基因,而绝大多数El-tor生物型菌株仅有一个毒素基因。在霍乱病的防治中,对菌株进行生物分型是必要的。 
两种生物型的区分方法见表5-3-38。 
 表5-3-38 霍乱弧菌的生物分型 
  
生物学特性  生物型   
  古典型 El-tor型   
V-P试验 - +   
溶血性 - +   
50U多粘菌素B纸片 S R   
鸡血球凝集 - +   

抗原分型:霍乱弧菌的血清学分型是依据菌体抗原。古典生物型和El-tor生物型的抗原同属Ο1群霍乱弧菌。 
Ο1群的霍乱弧菌还可以进一步分血清型。依菌株是否具备A、B因子,分为小川、稻叶、彦岛3个型别,血清分型见表5—3—39。 
表5-3-39 霍乱弧菌生物分型和血清型 
  
种 生物分型 血清型(Ο抗原因子)   
霍乱弧菌 古典型霍乱弧菌 
El-tor型霍乱弧菌 小川型(A、C) 
稻叶型(A、B) 
彦岛型(A、B、C)  

互联网
文章推荐