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什么是PCR熔解曲线法

2021.6.14
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超级艾蛋木啊

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PCR熔解曲线分析法是做realtime-pcr时分析,用来确定不同的反应产物,包括非特异性产物的分析方法。原理是在扩增反应完成后,通过逐渐增加温度的同时监测每一步的荧光信号来产生溶解曲线,随着反应中双链DNA变性,荧光染料又回复到游离状态导致荧光信号降低,用荧光信号改变的负的一次导数与温度作图,在扩增产物的溶解温度上有一特征峰(Tm,DNA双链解链50%的温度),因为它们在不同的温度溶解,所以用这个特征峰就可以将特异产物与其它产物如引物二聚体区分开。

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