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梯度pcr的梯度设置作用是什么

2021.6.21
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超级艾蛋木啊

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梯度PCR多半是为第一次使用某条引物，为了摸索最佳退火条件设定的。拿到引物的时候，会得到建议的Tm值，两条引物不同，你可以换算出一个退火温度。但是这个退火温度不一定是最佳反应条件，所以可以设定退火的梯度，最常用的是10C，这样每一个反应是一个退火温度，最后电泳可以观察到，在哪一个退火温度下，PCR产物产量和特异性都有保证。这样后面就可以选这个温度进行试验。
但是对于已经有最佳条件的引物，或是反应体系，是不需要做梯度PCR的。

梯度pcr
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