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溶解引物需要什么水

2021.7.18
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超级艾蛋木啊

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先离心!然后加入适量的水或TE溶解。一般配制成较高浓度的母液(约100μM),保存于-20℃。使用前取出其中一部分用ddH2O配制成10μM或20μM的工作液。引物浓度不宜偏高,浓度过高有两个弊端:一是容易形成引物二聚体(primer-dimer),二是当扩增微量靶序列并且起始材料又比较粗时,容易产生非特异性产物。一般说来,用低浓度引物不仅经济,而且反应特异性也较好。一般终浓度用0.25-0.5pM/μl较好。
1 引物的分子量如何计算? 比如:AAGCTTTTACCGC的分子量是多少?
2 OD值,1个OD值是不是等于40UG。
3 质量数,质量数的含义是什么,怎么计算?
4摩尔数(μmol)和终浓度(pM)和稀释水量(μl)
是不是计算稀释引物都要用到以上四点的各个参数?具体的公式是什么呢?
合成引物的单子上应该有算法:
1OD=33ug
1个碱基的分子量=324.5
(以上为近似值,通常都这样用)
1条引物的分子量=碱基数*324.5
质量数=OD*33ug
摩尔数=质量数/分子量
先离心的原因是什么?
因为引物合成后是干粉状的,在运输过程中可能会沾到管壁或管盖上,直接打开有些粉末可能会飘出去,引物的量就减少了。先离心使粉末都到管底,可以避免这种现象的发生。
然后根据以下公式可计算出所加双蒸水的量
33nmol/OD×管上所标OD值×100
是为10pmol/ul浓度的引物溶液,还可以由此推算其它浓度所需的双蒸水量。
可于-20度保存。
订引物回来的说明书背面一般都有引物稀释计算的说明的.
注意分装!

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