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TCA使蛋白变性后,会影响我的结果吗

2021.9.25
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超级艾蛋木啊

致力于为分析测试行业奉献终身

TCA与蛋白质之间主要有以下几个方面的作用:
① 在酸性条件下与蛋白质形成不溶性盐;
② 作为蛋白质变性剂使蛋白质构象发生改变,暴露出较多的疏水性基团, 使之聚集沉淀;
③ 随着蛋白质分子量的增大,其结构复杂性与致密性越大,TCA 可能渗入分子内部而使之较难被完全除去,在电泳前样品加热处理时可能使蛋白质结构发生酸水解而形成碎片,而且随时间的延长这一作用愈加明显;
④ 电泳图谱显示,BSA 、HSA 单体谱带有较明显的展宽现象,这可能是由于TCA 的结合,使SDS 与蛋白质的结合量产生偏差,从而造成蛋白质所带电荷的不均一性,造成迁移率的不一致

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