可溶性淀粉合成酶的测定原理！

可溶性淀粉合成酶的测定原理！

SSS（EC 2.4.1.21）通常以游离态存在于质体基质中，催化淀粉链延长，主要负责支链淀粉的合成。

检测原理：

SSS催化ADPG与淀粉引物(葡聚糖)反应，将葡萄糖分子转移到淀粉引物上，同时生成ADP，在反应体系中添加的丙酮酸激酶、己糖激酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶依次催化NADP⁺还原为NADPH，NADPH生成量与前一步反应中ADP生成量呈正比，340nm下测定NADPH增加量即可计算SSS活性。

活性计算：

1、按样本蛋白浓度计算：

单位的定义：每mg组织蛋白在反应体系中每分钟催化产生1nmol NADPH定义为一个酶活力单位。

GBSS活性（U/mg prot）＝样本稀释倍数（6.5）÷反应时间(2min)÷NADPH消光系数（6.22×10^-3）×ΔA÷蛋白质浓度（mg/mL）=522×ΔA÷蛋白质浓度（mg/mL）。

2、按照样本鲜重计算

单位的定义：每g组织在反应体系中每分钟催化产生1nmol NADPH定义为一个酶活力单位。

GBSS活性（U/g 鲜重）=样本稀释倍数（6.5）÷反应时间(2min)÷NADPH消光系数（6.22×10^-3）×ΔA÷样本鲜重(g/mL) =522×ΔA÷样本鲜重(g/mL)

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