标准曲线做出来之后的确可以计算含量。不过现在不经常用这种方法,而测定时使用外标。
先说标准曲线法:
至少5个浓度,平行配制两个样品。
你的提取色素:5ml→10ml,算是0.5的浓度,以它作为母液,然后逐级稀释;
取母液5ml→10ml,是0.25的浓度;
取母液2ml→10ml,是0.1的浓度;
取母液1ml→10ml,是0.05的浓度;
取母液0.5ml→10ml,是0.025的浓度;
然后分别取20ul,进样分析。结果出来之后是一个曲线,横轴是浓度,纵轴是峰面积。类似于:
咱们假定进样结果是这样的:
浓度 峰面积
0.5 5000
0.25 2500
0.1 1000
0.05 500
0.025 250
这个出来之后是会有一个方程的,就是y=nx+k之类的。
然后你测定含量的时候就好计算了。比如你取了1ml样品→10ml,进样分析看到峰面积是900.那么根据这条标准曲线就能计算出浓度,比如是0.09,然后你就知道你的样品含量是90%了。
外标法的意思是一样的。不过是对照品浓度与样品浓度相同,然后平行配制两份。每次测定都会进对照品和样品。
你取标准品1ml→10ml,平行配制两个浓度;然后配制两个样品。用峰面积来计算。
样品峰面积 * 对照品浓度
样品含量(%)=——————————————*100%
对照品峰面积 * 样品浓度
这个提色素我不太懂,我们是做化药的,现在都比较认同外标法。不过两者的计算方式其实是一样的,都是本着:样品峰面积和浓度成正比,的原理计算。