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高速逆流色谱的构造及特点

2021.10.17
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xujinping

致力于为分析测试行业奉献终身

  构造

  仪器的中心部分:(a) ITO多层线圈分离柱,它是由100-200米长、内径为1.6mm左右的聚四氟乙烯管沿具有适当内径的内轴共绕十多层而成,其管内总体积可达300mL左右。(b)平衡器,它可以调节重量,它的作用是让(a), (b)相对于中心轴两边重量平衡。当在旋转控制器的控制下,在齿轮传动装置作用下,(a),(b)同时绕中心轴作顺时针或反时针的行星运动,即(a) -(b)本身既在自转,但同时又在绕中心轴公转,公转转速可从0-4000r/min。从线圈分离柱中通过中空的中心轴还同时牵引出了线圈的两端,一端供泵入液用,一端输出液体。仪器工作需要互不相溶的两种液体,一相作固定相, 一相作移动相。仪器工作前,先将作为固定相一相的液体通过恒流泵压入线圈分离柱,然后用进样器将待分离的样品进样,最后用恒流泵压入移动相,同时启动中心部分运转直到转速大于600r/min。此时,两相在线圈分离柱中具有相对运动之势。由于移动相源源不断的压入,阻止了固定相的流出,同时,移动相带着样品在线圈分离柱中进行无限次的分配而使复杂样品得到分离。当移动相经过检测器时,由于不同的样品组分会产生不同大小的信号,用记录仪就能得到逆流色谱图谱,同时用馏分收集器分步收集移动相就会得到复杂样品被分开的组分。较大的制备型HSCCC,柱容积可达530m1,一次最多进样可达20g粗品;较小的分析型的HSCCC柱容积为8m1,进样量为几十微克,最大转速可达4000r/min,分析能力堪与HPLC相媲美。

  特点

  应用范围广,适应性好

  由于溶剂系统的组成及配比可以是无限多的,因而从理论上讲可以适用于任何极性范围内样品的分离,在分离天然化合物方面具有其独到之处。由于聚四氟乙烯管中的固定相为液体不需要固相载体,因而可以消除固-液色谱中由于使用固相载体而带来的吸附损失,特别适用于分离极性物质。

  操作简便,容易掌握

  仪器操作简单,对样品的预处理要求低,一般的粗提物即可进行的制备分离或分析。

  回收率高

  不需要固相载体,消除了由于样品在固相载体上的不可逆吸附和降解造成的损失,理论上样品的回收率可达。在实验中只要调整好分离条件,一般都有很高的回收率。

  重现性好

  如果样品不具有较强的表面活性作用,酸碱性也不强,即使多次进样,其分离过程都保持很稳定,而且重现性相当好。

  分离效率高,分离量较大

  由于其与一般的色谱分离方式不同,能实现梯度洗脱和反相洗脱,亦能进行重复进样,使其特别适用于制备性分离,产品纯度高,制备量大。

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