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用于PBMC 单核细胞的密度梯度离心分离

2021.11.01
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zhaoqisun

致力于为分析测试行业奉献终身

PBMC 单核细胞的密度梯度离心分离

血液主要由血清和血细胞组成,主要包括红细胞,白细胞和血小板等。白细胞还可以细分为淋巴细胞和单核细胞等。由于这些细胞具有简单的细胞核,统称为外周血单核细胞 (PBMC)。

PBMC 单核细胞可通过 Ficoll 密度梯度离心的方法,从血液中进行分离。

在 Ficoll 密度梯度离心的过程中,需要注意的有:

● 使 Ficoll-Paque Plus 和 PBS 升至室温,并用 70% 乙醇消毒血袋外部,良好的温度 (18-20℃) 控制有利于稳定 Ficoll 的密度,可以实现更好的分离效果

● 血液与 PBS 的比例保持 1:1,拧紧盖后颠倒混合几次

● 可以使用 ep 25 mL 锥底管,并轻轻的将血液/PBS 混合物铺置 Ficoll 上

● 离心参数:400 x g, 20 ℃,加减档 0/0,防止离心结束后的刹车震动,降低重悬,更利于良好分层。随后开启“Atset”功能,可以在达到指定转速后开始计时,离心 30 分钟

● 使用 PBS 洗涤细胞,离心除去残余的 Ficoll 液,400 x g, 20 ℃,10 分钟,重复几次


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