将所采集样品加热或冷却至20±1℃，按照下表将水样、接种液、营养缓冲液、硝化抑制剂（视情况）加入样品瓶，再用蒸馏水补充至总容量的体积数。将氢氧化钾加入密封杯中(密封杯壁上有四个小孔供二氧化碳与氢氧化钾颗粒接触)，将密封杯放入瓶口，使瓶口完全密封.然后将BOD测试瓶放人测定仪，拧紧瓶盖，放人恒温培养箱，打开电源开始测定，随着时间变化，在显示屏上将出现一条曲线，通过曲线可直接读出不同时刻的BOD值.
说明：
1) 一般情况下建议接种液加入量为20 mL。必要时调整接种液加入量，以获得最佳测试结果；
2）若待测水样中本身已经含有充足的微生物，则可以不加入接种液，而直接取水样的体积数为总容量的体积数。稀释因子皆为1。
3) 若试样中含有硝化细菌，有可能发生硝化反应，需加入一颗硝化抑制剂。
计算修正结果：BOD修正值= BOD仪器读值 × 稀释因子
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