含有特异性抗体的抗血清是放射免疫分析的主要试剂,常以抗原免疫小动物诱发产生多克隆抗体而得。抗血清的质量直接影响分析的灵敏度和特异性。抗血清质量的指标主要有亲和常数、交叉反应率和滴度。

①亲和常数(affinityconstant):常用K值表示。它反映抗体与相应抗原的结合能力。K 值的单位为 mol/L,即表示 1mol 抗体稀释至若干升溶液中时,与相应抗原的结合率达到50%。抗血清K值越大,放射免疫分析的灵敏度、精密度和准确度越佳。抗血清的K值达到 109～1012mol/L 才适合用于放射免疫分析。

②交叉反应率:放射免疫分析测定的物质有些具有极为相似的结构,例如甲状腺素的 T3、T4,雌激素中的雌二醇、雌三醇等。针对一种抗原的抗血清往往对于其类似物会发生交叉反应。因此,交叉反应率反映抗血清的特异性,交叉反应率过大将影响分析方法的准确性。交叉反应率的测定方法为:用与抗血清相应抗原及其类似物用同法进行测定,观察置换零标准管50%时的量。以 T3 抗血清为例,置换零标准管50% T3为 1ng,其类似物T4 则需200ng,则其交叉反应率为:1/200=0.5%。

③滴度:指将血清稀释时能与抗原发生反应的最高稀释度。它反映抗血清中有效抗体的浓度。在放射免疫分析中滴度为在无受检抗原存在时,结合50%标记抗原时抗血清的稀释度。