荧光素
1)FITC
2)RB200
3)TRITC
4)镧系:Eu、Tb
5)PE
6)其它
常见荧光素的特性
1)FITC:黄色结晶粉末,吸收光:490~495nm,发射光:520~530nm,明亮的黄绿色荧光。
2)RB200:橘红色粉末,吸收光570nm,发射光595~600nm,橘红色荧光。
3)TRITC:紫红色粉末,吸收550nm,发射光620nm,橙红色荧光。
4)镧系:Eu、Tb
5)PE:吸收光490~560nm,发射光595nm,红色荧光。
6)其它:酶作用后产生荧光物质。
酶作用生物质
酶 底物 产物 激发光 发射光
Β-G MUG MU 360 450
AP MUP MU 360 450
HRP HPA 二聚体 317 414
⑷合适荧光素的选择
1)具有与蛋白质形成共价键的化学基团。
荧光素-N=C +NH-蛋白质 荧光素-N-C-N-蛋白质
‖ ︱ ︱‖ ︱
S H H SH
2)荧光效率高,标记后下降不明显。
3)荧光色泽与背景色泽对比鲜明。
4)标记后能保持生物学活性和免疫活性
5)标记方法简单、快速。
6)安全无毒
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