外周血中单个核细胞(淋巴细胞和单核细胞)的比重介于1.075~1.090之间,红细胞及粒细胞在1.092左右,血小板在1.030~1.035之间,因而可利用一种比重介于1.075~1.092之间而近于等渗的溶液作密度梯度离心,使一定比重的细胞按相应密度梯度分布而加以分离。
对分离介质的基本要求是:
①对细胞无毒;
②基本等渗;
③不溶于血浆及分离物质;
④有特定的比重。
Ficoll分离液(2份6%聚蔗糖蒸馏水溶液与1份34%泛影葡胺生理盐水溶液混合)为常规的淋巴细胞分离液,其比重为1.077 ±0.002,主要用于分离外周血中单个核细胞。
密度梯度离心后其分布由上到下依次为:稀释的血浆层、单个核细胞层、粒细胞层和红细胞层。