1 基本要求
生产和检定用设施、原材料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”的有关要求。
2 制造
2.1 专用原材料
2.1.1 抗-HBs
可使用HBsAg多克隆抗体或单克隆抗体，抗体的活性、纯度应符合要求。
2.1.2 辣根过氧化物酶（或其他适宜标记的酶）
辣根过氧化物酶的RZ值应不低于3.0，其他标记用酶应符合相应的要求。
2.1.3 阳性对照用血清或血浆
HBsAg检测为阳性的人血清或血浆。
2.1.4 阴性对照用血清或血浆
HBsAg检测为阴性的人血清或血浆。
2.1.5 微孔板
CV（%）应不高于10%。
2.2 制备程序
2.2.1 包被抗体的纯化
采用盐析法、离子交换色谱法纯化，亦可釆用其他适宜的纯化方法。抗体纯度用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法或其他方法测定，纯化后抗体的活性、纯度应符合要求，于低温下保存。
2.2.2 酶标记抗体的制备
抗体纯化及鉴定方法同2.2.1项，釆用常规过碘酸钠-乙二醇法或其他适宜方法进行辣根过氧化物酶或其他酶标记，酶标记抗体的活性、纯度应符合要求，加入适当保护剂后于低温下保存。
2.2.3 包被抗体浓度和酶标记抗体浓度的选定
采用方阵滴定法选择最佳包被抗体浓度和酶标记抗体的工作浓度。
2.2.4 包被抗体板的制备
采用最佳包被浓度的抗体包被微孔板孔，经封闭、干燥和密封等处理后，于2～8℃保存。对包被板须抽样检定，应符合3.1.1～3.1.4项和3.1.7项要求。
2.2.5 阳性对照
选用HBsAg为阳性的人血清或血浆制备，经60℃、1小时处理后，除菌过滤，于2～8℃保存；也可采用重组蛋白抗原配制。
2.2.6 阴性对照
选用HBsAg为阴性的5份以上人血清或血浆混合制备，经60℃、1小时处理后，除菌过滤，于2～8℃保存。
2.2.7 反应时间的设置
检测过程中加入检测样本后反应时间应不低于60分钟，加入酶结合物后反应时间应不低于30分钟，加入显色液后显色时间应不低于30分钟。
2.3 半成品检定
按3.1项进行。
2.4 成品
2.4.1 分批
应符合“生物制品分包装及贮运管理”规定。
2.4.2 分装与冻干
应符合“生物制品分包装及贮运管理”规定，分装或冻干后保存于2～8℃。
2.4.3 规格
应为经批准的规格。
2.4.4 包装
应符合“生物制品分包装及贮运管理”规定。
3 检定
3.1 半成品检定
3.1.1 阴性参考品符合率
采用国家参考品进行检定，阴性参考品符合率（-/-）应为20/20；或采用经国家参考品标化的参考品进行检定，应符合要求。
3.1.2 阳性参考品符合率
采用国家参考品进行检定，阳性参考品符合率（+/+）应为3/3；或采用经国家参考品标化的参考品进行检定，应符合要求。
3.1.3 最低检出量
采用国家参考品进行检定，adr亚型最低检出量应≤0.1 IU/ml，adw亚型最低检出量应≤0.1 IU/ml，ay亚型最低检出量应≤0.2 IU/ml；或采用经国家参考品标化的参考品进行检定，应符合要求。
3.1.4 精密性
用国家参考品或经国家参考品标化的参考品进行检定，CV（%）应不高于15%（n=10）。
3.1.5 微生物限度检查
依法检查（通则1105与通则1106）含有蛋白成分的液体组分，半成品加抑菌剂分装后，对留样进行微生物限度检查，需氧菌总数应不高于102cfu/ml，霉菌和酵母菌总数应不高于101cfu/ml。
3.1.6 水分
冻干组分水分应不高于3.0%（通则0832）。
3.1.7 稳定性试验
试剂各组分于37℃放置至少3天（有效期为6个月），应符合3.1.1～3.1.4项要求。
3.2 成品检定
3.2.1 物理检查
3.2.1.1 外观
液体组分应澄清透明；冻干组分应呈白色或棕色疏松体。
3.2.1.2 溶解时间
冻干组分应在3分钟内溶解。
3.2.2 阴性参考品符合率
按3.1.1项进行。
3.2.3 阳性参考品符合率
按3.1.2项进行。
3.2.4 最低检出量
按3.1.3项进行。
3.2.5 精密性
按3.1.4项进行。
3.2.6 稳定性试验
出厂前进行，方法按3.1.7项进行。
4 保存及有效期
于2～8℃避光保存。自包装之日起，按批准的有效期执行。
5 使用说明
应符合“生物制品分包装及贮运管理”规定和批准的内容。
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