（1）准备4排小试管，每排7支，标明记号。
（2）另取中号试管1支，加入生理盐水3.8ml及被检血清0.2ml（吸注液应将吸管外壁拭净，注液时把吸管插至管底，以防过多沾于试管内壁）。
（3）用吸管将上述二者混匀（需用吸管连续吸注3次，吸时深入液面下，注时离开液面）使成1∶20的血清稀释液。
（4）吸取上述1∶20血清稀释液2ml，按每管0.5ml液量分别加入各排
之第1管。
（5）于上述中号试管内加入生理盐水2ml并混匀，此种血清经2倍稀释（由1∶20稀释成1∶40）。
（6）再吸取此1∶40血清稀释液2ml，按每管0.5ml液量分别加入各排之第2管。
（7）如此连续稀释到各排第6管为止。各排的第7管只加生理盐水0.5ml，不加血清，作为抗原对照。此时各排第1至第6管的血清稀释度依次为1∶20、1∶40、1∶80、1∶160、1∶320、1∶640。
（8）将前述的四种诊断菌液分别加于1、2、3、4各排的每一试验管及抗原对照管内，每管0.5ml。此时各排第1至第6管的血清加入等量菌液而又稀释1倍，血清最后稀释度已成为1∶40、……1∶1280。
（9）将所有试管摇匀后，置37℃温箱或水浴过夜（或56℃2～4h）以促进反应，按时观察结果。
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