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血氨测定方法及影响因素

2021.12.08
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xujinping

致力于为分析测试行业奉献终身

  测定方法

  有两类血氨测定方法。一类为两步法,先从全血中分离出氨,再进行测定,如扩散法(已淘汰)和离子交换树脂法;另一类为一步法,不需从全血中分离出氨直接测定,如酶法和离子选择电极法。

  (1)直接显色测定法:在床旁取静脉血2ml,以钨酸沉淀蛋白后,用酚-——次氯酸盐显色,参照标准计算氨含量。如严格掌握实验条件,本法分析结果能满足临床要求。

  (2)谷氨酸脱氢酶速率法:血浆中的氨在足量的α-酮戊二酸和NADPH存在时,经谷氨酸脱氢酶作用生成谷氨酸,并消耗NADPH,NADPH的下降速率与血浆氨浓度成正比。

  (3)离子交换法:去蛋白血浆标本中的氨先被阳离子交换树脂吸附,再被分离出来,用酚——次氯酸盐显色反应求出氨含量。本法特异性好,精密度和准确度均较高,已被作为血氨测定的参考方法。

  (4)氨电极法:氨气敏电极选择性较高,故这类方法特异性好、准确度较高,但是耐用性差,而且电极稳定性受温度、渗透压、中介液等多种因素影响。

  血氨测定的准确性在很大程度上取决于标本的留取和收集,血氨测定应用抗凝血而不能用血清做标本,因为在血凝过程中会产生氨,且抗凝剂一般用肝素。红细胞内氨的含量较血浆中高2.8倍,故溶血标本或者血液标本久置都会使血浆氨的含量急剧增高。血液标本放入试管中要加盖,低温离心5分钟,迅速取出血浆进行测定,并且要在30分钟内完成,如果不能及时检测,应将标本放于2-8度冰箱,最多放置3小时。分析过程中如果受到氨的污染也会导致血氨测定值假性增高。最后,不同仪器不同实验方法分析得到的结果也会有很大差异。

  影响因素

  由于血浆中氨含量很低;血浆中的谷氨酰胺和多肽水解释放出氨;红细胞内氨较血浆高2.8倍,故血标本久置会使血浆氨含量急骤增高;分析过程受氨污染的机会也较多;不同方法的分析结果有很大差别。

  临床意义:在肝功能不全时,血氨的来源增多或去路减少,引起血氨升高。高浓度血氨通过干扰脑组织能量代谢,对神经细胞膜的抑制作用,以及对神经递质的影响,出现脑功能障碍而导致昏迷。通过测定血氨水平可以监测肝功能不全过程中,血氨升高程度,及时预防肝昏迷发生。

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