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PCR仪关于引物的问题及解决办法?

2021.12.28
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zhaoqisun

致力于为分析测试行业奉献终身

  1. 应该选择哪种纯化方法?

  取决于实验目的和引物的长度

  2. 为什么我订购了50nmol,但是收到却只有40nmol?

  50nmol是起始量

  3. 怎样制备100μM的储液?

  体积(μl)=质检报告上的nmol数目×10

  4. 怎样设计引物?

  *一般长度20-30bp;

  *至少50%的GC含量;

  *避免引物二聚体和二级结构;

  *引物对的Tm值应该接近。

  5. 引物序列有插入或缺失?

  *使用上游和下游引物多测几个克隆。

  *请选择正确的纯化方法。

  6. PCR无结果?

  *请检查引物设计是否正确;

  *请检测OD读数是否正确;

  *做一个阳性对照和一个阴性对照


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