用兔抗人IgG4的多克隆抗体（IgG4Ab）包被成固相板，以识别结合待测标本中的IgG4。用生物素标记IgG4Ab得Bio-IgG4Ab；用亲和素标记辣根酶得HRP-A。在已包被IgG4Ab的固相板中加入IgG4标准品（或待测样品），反应、洗涤后，加入Bio-IgG4Ab，反应、洗涤后，加入HRP-A，反应、洗涤后，板上形成IgG4Ab-IgG4-Bio-IgG4Ab-HRP-A复合物，加酶底物显色，用酶标仪在490 nm波长测定OD值，作标准曲线，根据标准曲线，查出标本中IgG4含量。该法测定范围：2.5～200ng/mL，最低检出量2.1ng/mL，批内和批间CV分别8.4%和11.2%。测得血清IgG4含量：青年人（30名）为37.7±2.3ng/mL；30名献血员为42.7±9.9ng/mL，49例重症监护患者明显升高为71.2±9.2ng/mL；49例肺部感染患者明显降低为28.4±9.2 ng/mL。
结果 表明该法稳定，灵敏度适于检出人血清IgG4水平。
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