1.仪器装置
电泳室及直流电源同纸电泳。
2.试剂
(1) 醋酸-锂盐缓冲液(pH3.0)
取冰醋酸 50ml,加水800ml混合后,用氢氧化锂调节pH**3.0,再加水**1000ml。
(2) 甲苯胺蓝溶液
取甲苯胺蓝 0.1g,加水100ml使溶解。
3.操作方法
(1)制胶取琼脂糖约 0.2g,加水10ml,置水浴中加热使溶胀完全,加温热的醋酸-锂盐缓冲液(pH3.0)10ml,混匀,趁热将胶液涂布于大小适宜(2.5cm×7.5cm或4cm×9cm)的玻璃板上,厚度约 3mm,静置,待凝胶结成无气泡的均匀薄层,即得。
(2) 标准品溶液及供试品溶液的制备照各药品项下规定配制。
(3) 点样与电泳在电泳槽内加入醋酸-锂盐缓冲液(pH3.0),将凝胶板置于电泳槽架上,经滤纸桥浸入缓冲液。于凝胶板负极端分别点样 1μl,立即接通电源,在电压梯度约 30V/cm,电流强度1～2mA/cm的条件下,电泳约20分钟,关闭电源。
(4) 染色与脱色取下凝胶板,用甲苯胺蓝溶液染色,用水洗去多余的染色液**背景无色为止。
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