裂解液是**普遍使用的蛋白提取试剂,可根据文献或经验自行配制,也可购买商业化的产品。常见的细胞裂解液有 NP40、Triton X-100、RIPA buffer 等。下表是根据目的蛋白的不同定位选择裂解液的建议。虽然裂解液的使用范围比较广泛,能够满足总蛋白的提取,但是无法做到特异蛋白的提取,特别是遇到低丰度蛋白或者活性蛋白功能分析时,通用型的裂解液存在很大的局限性。
样品类型 | 裂解液(Sigma-Aldrich) |
全细胞 | NP-40或RIPA(货号:R0278) |
细胞质(可溶) | Tris-HCl(货号:T3253) |
细胞质(细胞骨架) | Tris-Triton(货号:X100) |
细胞膜结合部分 | NP-40(货号:NP40)或RIPA |
细胞核 | RIPA或核裂解液 |
线粒体 | RIPA或线粒体分离试剂 |
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