常见色谢图问题及相关原因分析和解决办法
现象 | 原因 | 排除方法 |
峰宽 | 1.流动相组成变化 2.流动相流速太低 3.漏液(特别是在柱子和检测器之间) 4.检测器时间常数太大 5.柱外效应影响:
6.级冲液浓度太低 7.保护柱污染或失效 8.柱头塌陷,色谱柱污染或失效,塔板数较低 9.呈现两个或多个未被完全分离的物质的峰 10.柱温过低11.保留时间过长 | 1.重新制备新的流动相 2.调节流速 3.检查接头是否松动、泵是否漏液、是否有盐析出以及不正常的噪声。如果必要更换密封 4.调整设定 5.采取各种措施尽量减小柱外效应:
6.增大缓冲液浓度,调整合适的pH值 7.更换或重新装填保护柱 8.重新装填被污染的部分,再生色谱柱或更换新柱 9.优化分离条件,分离未被分离组分 10.调整适宜柱温 11.改变流动相组分增加洗脱能力或者使用梯度洗脱 |