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积液溶菌酶的注意事项及检查过程

2022.2.14
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xujinping

致力于为分析测试行业奉献终身

  注意事项

  检查前:受试者停止服用药物并尽量减少运动以便保证检测的质量。

  检查时:放松身体,谨听医师的操作。

  不适宜人群:没有。

  检查过程

  穿刺采取积液标本后,立即送检。检测方法:

  1.溶壁微球菌平板的制备。溶壁微球菌在使用前于琼脂斜面培养基上传代一次,然后再接用于普通琼脂平板37℃培养24h。用无菌蒸馏水洗下菌苔,2000r/min离心30min,弃上清。再加蒸馏水轻轻混匀,2000r/min离心30min,弃上清,称沉淀物湿重,用无菌蒸馏水配成100g/L的浓菌液(菌液应在临用前配制,不宜存放过久),加热杀死,备用。

  2.称琼脂粉1g,加入的1/15mol/L pH6.4PBS 100ml,即成1%琼脂。

  3.取溶菌酶标准品,用1/15mol/L pH6.4PBS制成5、25、100mg/L稀释液。

  4.取己配制好的菌液1ml,加到50~60℃己溶化的1%琼脂中,摇匀,倾注平板(直径7~9cm平板加1%琼脂15ml),待冷凝。

  5.用打孔器在溶壁微球菌琼脂平板上打孔,孔间距18~20mm,用牙签挑去孔内琼脂。

  6.用毛细吸管取唾液(新鲜收集,盛于洁净平皿内,取上层清液)或血清,加入琼脂孔内。同时在另一孔内加满标准溶菌酶作为阳性对照。

  7.置25~30℃ 18~24h,观察结果。

  8.在每批测定同时,将各种浓度的溶菌酶标准液加于小孔中,同法测定溶菌环直径,用半对数纸,以溶菌酶浓度为纵坐标(对数坐标),溶菌环直径为横坐标,绘制标准曲线。从曲线上查出每毫升待检品所含溶菌酶的微克数。

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