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5'-NT测定主要用于肝胆系统疾病的诊断和骨骼疾病的鉴别诊断。血清5'-NT活性升高主要见于肝胆系统疾病,如阻塞性黄疸、肝癌、肝炎等,其活性变化与ALP一致。但骨骼系统疾病,如肿瘤转移、畸形性骨炎、佝偻病、甲状旁腺功能亢进等,通常ALP活性升高,而5'-NT正常。因此ALP和5'-NT同时测定有助于肝胆和骨骼系统疾病的鉴别诊断。