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DNA测序-EDF胶片显影法的介绍

2022.3.08
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coco5517

认真做好每一件喜欢的事,把每一件要做的事都变成喜欢并认真去做的事

  使用EDF胶片可增强测序条带的对比度,如果测序胶上条带很淡,我们建议把数据转移至EDF胶片,银染胶在其影像转移至EDF胶片之后可增强条带可读性。

  1. 在暗室内,将染色过的粘于玻璃板的凝胶(胶面向上)置于荧光灯箱上。如有合适的漫射板,亦可用白灯箱,为确保曝光时间,用一小条EDF胶片曝光不同时间,检查不同的曝光强度,一般曝光20~40秒可得较好结果。

  2. 在红灯下找到EDF胶片有缺刻的一角,然后把胶片置于凝胶上,使缺口位于左上角。由于EDF胶片是单面的,因此必须确保缺口在左上角。

  3. 在EDF胶片上放置一干净、干燥的玻璃板,开亮灯箱约20秒。

  4. 用冲显放射自显影胶片的步骤手工显影EDF胶片,可使用下列操作过程:

  (1) 在Kodak GBX显影液中显影1~5分钟;

  (2) 水洗1分钟;

  (3)在Kodak GBX定影液中定影3分钟;

  (4)水洗1分钟。

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