斑点杂交是指将DNA或RNA样品直接点在硝酸纤维素滤膜上,然后与核酸探针分子杂交,以显示样品中是否存在特异的DNA或RNA。同一种样品经不同倍数的稀释,还可以得到半定量的结果。所以它是一种简便、快速、经济的分析DNA或RNA的方法,在基因分析和基因诊断中经常用到,是研究基因表达的有力工具。但由于目的序列未与非目的序列分离,不能了解目的序列的长度。尤其当本底干扰较高时,难以区分目的序列信号和干扰信号。
1、材料:待分析的DNA或RNA样品,已标记的探针。
2、设备:狭槽点样器,真空泵,恒温水浴,真空烤箱等。
3、试剂:
(1)100% 甲酰胺。
(2)甲醛(37%)。
(3) 20×SSC。
(4)0.1mol/L NaOH。
(5)硝酸纤维素滤膜。
(6)滤纸。