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分子杂交技术-斑点杂交的实验简介

2022.3.09
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coco5517

认真做好每一件喜欢的事,把每一件要做的事都变成喜欢并认真去做的事

  斑点杂交是指将DNA或RNA样品直接点在硝酸纤维素滤膜上,然后与核酸探针分子杂交,以显示样品中是否存在特异的DNA或RNA。同一种样品经不同倍数的稀释,还可以得到半定量的结果。所以它是一种简便、快速、经济的分析DNA或RNA的方法,在基因分析和基因诊断中经常用到,是研究基因表达的有力工具。但由于目的序列未与非目的序列分离,不能了解目的序列的长度。尤其当本底干扰较高时,难以区分目的序列信号和干扰信号。

  1、材料:待分析的DNA或RNA样品,已标记的探针。

  2、设备:狭槽点样器,真空泵,恒温水浴,真空烤箱等。

  3、试剂:

  (1)100% 甲酰胺。

  (2)甲醛(37%)。

  (3) 20×SSC。

  (4)0.1mol/L NaOH。

  (5)硝酸纤维素滤膜。

  (6)滤纸。

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