固相萃取技术的分离模式有多种,具体使用哪种方法,主要取决于待处理样品的相对分子质量(Mr)及样品的性质。
1.选择固相萃取应考虑的问题：
(1)待测物的化学性质:功能基团、能否离子化,是水溶性还是脂溶性。
(2)基质的性质:pH值、离子强度、是水还是有机溶剂。
(3)类似干扰物的性质。
(4)待测物在样品中的浓度。
(5)分析的检测限及灵敏度。
(6)待测物是否需要富集、纯化。
2.固定相的选择(根据相似相溶原则来选择固定相)：SPE的固定相是样品分离、纯化的关键,由于固定相关系到SPE的重复性、回收率、灵敏度、特异性,因此SPE的吸附剂一直是人们关注的热点。自SPE发明以来,聚合树脂的样品污染一直令人苦恼,1978年Waters公司发明了C18键合硅胶制成一次性小柱(Sep-pakR),具有很高的可靠性和稳定性,已广泛应用于临床生化检验。凡可用于HPLC的吸附剂均可用于SPE,包括近年来针对药物滥用检测的“designerphase”。吸附剂的选择既要考虑样品各组分与固定相的亲和力、待测物与洗脱剂的作用力,还要考虑其通用性。就化学键合相而言,非极性键合相有C1、C2、C4、C6、C8、环己烷基、苯基、二苯基、C18等；极性和弱离子交换相有:氰基、二醇基、氨基、伯胺/仲胺基、丁酸基；强离子交换相有:丙磺酸基、苯磺酸基、季铵基等；吸附树脂有:XAD-2、GDX、X-5。具有选择专属性的苯基磺酸可用于分离共平面连位羟基结构分子。对于生物样品,大多溶解在水性物质里,待测物被离子化,用离子交换萃取分离极性很强的物质,非极性或弱极性分析物用R-P提取,正相萃取用于提取有机溶剂中的极性物质。吸附剂的用量必须保证从样品中有效吸附所有的待测物,不保留基质成分,增加吸附剂的量可增大吸附能力,但同时也增大洗脱体积,使待测物稀释,给干燥和定量带来困难。因此在达到有效吸附的前提下用最小量的吸附剂。
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