(一)采样
按实验6—1采集土样，选合成氨车间和堆放合成氨场地周围土样。
(二)富集培养
称取土样1g。接入到盛有20 m1硝化细菌增殖培养液的250 ml锥形瓶中，28℃振荡培养10-14d，每隔几天在白瓷板上分别加2—3滴格里斯氏试剂及二苯胺硫酸试剂。然后用无菌滴管取出1滴增殖培养液的培养物加于上面两试剂中．搅和均匀。检查增殖培养液中NO2-的减少(溶液由红色、粉红色变为无色，机理见实验7—3)和NO3-的形成(NO3-氧化二苯胺的特有反应，溶液由无色变为深蓝色)。为淘汰伴生的异养细菌，富集培养10 d后，用无菌微口滴管吸取1—2滴富集培养物接入新鲜的硝化细菌增殖培养液中，继续振荡培养，继续监测NO2-的减少和NO3-的形成，在连续转移的后期增殖培养液中．可通过不断补加KNO2，增加硝化细菌数日，并有效地抑制伴生的异养型细菌生长。
(三)分离纯化
取富集培养液，通CO2气体30min，然后静置30 min 。再通过下列三种方法分离纯化。
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