临床物理检查方法介绍--脑脊液的显微镜检查介绍

脑脊液的显微镜检查介绍:

 脑脊液显微镜检查是通过对脑脊液细胞计数和分类计数,从而为判断各种疾病提供依据。

脑脊液的显微镜检查正常值:

 正常人脑脊液中有少量的白细胞,无红细胞。细胞数为:成人:(0-8)×106/L儿童:(0-15)×106/L
 脑脊液中细胞多为大单核细胞和淋巴细胞,两者之比约为3:7,偶见内皮细胞。

脑脊液的显微镜检查临床意义:

 异常结果:
 (1) 脑脊液细胞数可增多,其增多的程度及细胞的种类与病变的性质有关。可能是中枢神经系统病变。
 (2) 脑脊液细胞数可中度增多,常以淋巴细胞为主,为中枢神经系统病毒感染、结核性或霉菌性脑膜炎。
 (3) 脑脊液细胞数显著增加,以中性粒细胞为主,为细菌感染时如化脓性脑膜炎。
 (4) 脑寄生虫病时,可见较多的嗜酸性粒细胞。
 (5) 脑室或蛛网膜下腔出血时,脑脊液内可见多数红细胞。
 (6) 有时可在脑脊液中找到红斑狼疮细胞,为红斑狼疮病。
 (7) 化脓性脑膜炎经过有效的抗生素治疗后,细胞总数迅速下降;结核性脑膜炎患者在早期以中性分叶核细胞为主,以后则淋巴细胞较多;脑血管意外病人脑脊液中的红细胞数目减少,结合临床,预示着出血既将停止或已经停止。
 需要检查人群:中枢神经系统感染性疾病,脑血管病,脑寄生虫病,中枢神经系统肿瘤。

脑脊液的显微镜检查注意事项:

 不合宜人群:无
 检查前禁忌:无
 检查时要求:脑脊液细胞计数应及时进行,一般应在1小时内进行;穿刺损伤血管,导致血性脑脊液,细胞总数已无意义,白细胞计数也须校正后才有意义;细胞计数时,如发现较多的红细胞有皱缩或肿胀现象,应予以描述,以协助临床医生鉴别陈旧或新鲜出血;细胞计数时,须注意把红细胞或淋巴细胞与新型隐球菌相区别:1新型隐球菌具有“出芽”现象,不溶于乙酸,滴加0.35mol/L的乙酸后,显微镜下仍保持原形,而红细胞则被乙酸溶解消失,淋巴细胞则胞核和胞浆更为明显。2滴加印度墨汁一滴,加盖玻片,高倍镜下见新型隐球菌有夹膜,不着色,而红细胞或淋巴细胞无此现象。细胞计数板用完后,应用75%的酒精消毒60分钟。忌用苯酚消毒,因有损计数池的刻度。

脑脊液的显微镜检查检查过程:

 主要分五项检查:
 一、细胞总数
 (1) 直接计数法适用于脑脊液标本比较清亮或微混。用滴管吸取已混匀的脑脊液标本少许,直接滴入细胞计数板,充入计数池内,静置2-3分钟,低倍镜下计数两个池内的四角和中央大格共10个大格内的细胞数,即为1μl脑脊液中的细胞总数(红、白细胞总数)。在书写报告时,再换算成每升脑脊液中的细胞总数。
 (2) 稀释计数法适用于如果脑脊液的细胞过多、混浊或带血的脑脊液。可用血红蛋白毛细吸管吸取混匀的脑脊液20μl,加入有红细胞稀释液0.38μl的小试管中,混匀后滴入计数池内,用低倍镜计数4个大方格的细胞总数,乘以50,即为每微升脑脊液的细胞总数,最后换算成每升脑脊液的细胞总数报告。
 二、白细胞计数
 (1) 直接计数:非血性标本,用吸管吸取冰乙酸后全部吹出,使管壁仅附着少许冰乙酸,然后用同一吸管吸取少量混匀的脑脊液标本,数分钟后红细胞就会完全溶解,再滴入计数池内,按上法计数。
 (2) 稀释计数:如白细胞过多,可用白细胞稀释液稀释后,按上法计数,注意计数结果应乘以稀释倍数。
 (3) 血性标本的校正计数:混有血液的脑脊液标本混匀后,用1%的冰乙酸溶液稀释后仍按上法计数。为了剔除因出血而带来的白细胞,可用下式进行校正。每微升CSF内白细胞校正数=每微升CSF未校正的白细胞数-
 三、白细胞分类计数
 (1) 直接分类法:在白细胞直接计数后,转高倍镜观察,依据细胞形状和细胞核的形态进行分类,共计数白细胞和内皮细胞100个,分别计算单个核细胞和中性粒细胞所占的比例,以百分数表示。如白细胞总数不足100个,则直接写出单个核细胞和中性粒细胞的具体数字。如白细胞总数在30以下,可不做直接分类计数或改用染色分类计数。
 (2) 染色分类法:脑脊液标本离心,取沉淀涂片,制成均匀薄膜,置室温或37℃孵箱中,干燥后以瑞氏染色,油镜下进行分类计数。以百分比表示之。
 四、病原体形态学检查
 (1) 细菌—临床怀疑流行性脑脊髓膜炎或化脓性脑脊髓膜炎时,应做细菌学涂片检查。操作如下:
 ① 脑脊液标本2-3ml,以3000rpm离心15分钟,去上清液,将沉淀物涂在洁净玻璃片上,共制片2张,涂片自然或在37℃温箱中干燥固定,切勿用火焰固定。
 ② 涂片固定后,一张用亚甲蓝染色,另一张用革兰氏染色。
 ③ 革兰氏染色涂片用于检查肺炎双球菌、流感杆菌、葡萄球菌、绿脓杆菌、链球菌、大肠杆菌等,亚甲蓝染色用于检查脑膜炎双球菌。如找到细菌,则按其染色性质及形态报告。
 ④ 如怀疑结核性脑膜炎,可将脑脊液标本静置24小时,取其液面薄膜涂片,置37℃温箱中干燥固定,作抗酸染色,油镜下找抗酸杆菌。
 ⑤ 采集标本时应注意污染。显微镜观察时应注意细胞内外的细菌形态,报告时应予以描述。
 (2) 真菌检查—新型隐球菌的检查
 ① 取脑脊液标本,以2000rpm离心10分钟,沉淀物涂片,加经过过滤的优质细墨汁一滴,混合后加盖玻片显微镜下检查。
 ② 先用低倍镜观察,如发现在黑色背景下有圆形透光小点,中间有一细胞大小的圆形物质,即转用高倍镜仔细观察其结构,新型隐球菌直径5-20μm,可见明显的厚夹膜,周围有较强的折光,并有出芽的球形孢子。
 ③ 发现上述特征,即可报告墨汁涂片找到“隐球菌属”。并须进一步作真菌培养。

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