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培养细胞的生命期的相关介绍

2022.3.19
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coco5517

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  指细胞在培养过程中持续增殖和生长的时间。一般根据细胞种类、性状和原供体的年龄的情况而定。

  如:二倍体成纤维细胞,在不冻存和反复传代条件下可传30~50代,相当于150~300个细胞增殖周期,能维持一年左右的生命,细胞便开始凋亡(apoptosis)。 细胞在生存过程中经历以下三个阶段

  1.原代培养期(primary culture)

  组织到第一次传代时间大约为1~4周

  特点:

  细胞移动活跃,但分裂不旺盛,多呈二倍体核型。

  原代与体内原组织形态结构和功能活动基本相似。

  各细胞的遗传性状互不相关,细胞相互依存性强,如果把这种稀释分散成单细胞,在软琼脂培养基中进行培养,细胞克隆的形成率(cloning efficiency)下降,表明细胞独立生存性差。

  2.传代期(passage)

  初代培养细胞一经传代便称之为细胞系(cell line)

  特点:

  细胞增殖旺盛,并维持二倍体核型,也叫二倍体细胞系(diploid cell line)为了保存二倍体细胞性质,细胞应在初代或传代早期冻存为好。

  一般细胞在10代以内冻存。

  冻存配方:

  向培养液加入保护剂二甲基亚砜(DMSO)或甘油,封入安瓶中。

  存于在液氮中温度可达到-196℃,可长期储存。如解冻后细胞复苏,仍能继续增殖生长,细胞性状不受影响,成为保存细胞最主要的手段。

  3.衰退期

  特点:细胞仍生存 增殖减慢 不增殖 轮廓增强 衰退凋亡

  注意:细胞在三期中的任何一期(一般发生在传代后期或衰退期)在某些因素影响下,如血清质量不佳、病毒污染、温度和pH不稳等,细胞可能发生自发转化(spontaneous transformation);

  细胞可能获得永生性(immortality) 或称为恶性性(malignancy)。细胞获得持久性的增殖能力,这样的细胞群体称为连续细胞系(continuous cell line)。而细胞获得不死性后,细胞核型大多变成异倍体(heteroploid)接触抑制消失。

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