分析测试百科网

搜索

喜欢作者

微信支付微信支付
×

细胞分裂指数的测定方法

2022.3.19
头像

coco5517

认真做好每一件喜欢的事,把每一件要做的事都变成喜欢并认真去做的事

  分裂指数测定可用盖片培养法,亦可直接在小平皿中进行。在计算分裂相时要掌握好分裂相标准,选择密度近似区观察计数。

  一、原理

  体外培养细胞生长、分裂繁殖的本领,可用分裂指数来显示.它与生长曲线有一定的联系,如跟着分裂指数的不断提高,细胞也就进入了指数生长期.

  分裂指数指细胞群体中分裂细胞所占的百分比,它是测定细胞周期的一个主要指标,也是不同实验研究选择细胞的主要依据.

  二、仪器、用品与试剂

  1、仪器与用品:CO2培养箱、普通显微镜、细胞培养皿、盖玻片、吸管

  2、试剂:培养液、胰酶、甲醇、冰醋酸、Giemsa染液

  三、操作步骤

  1、消化细胞,将细胞悬液接至内含盖玻片的培养皿中.

  2、CO2培养箱中培养48小时,使细胞长在盖片上.

  3、取出盖片,按下列顺序操作:

  PBS漂洗3分钟→甲醇:冰醋酸=3:1固定液中固定30分钟→Giemsa液染色10分钟→自来水冲洗.

  4、盖片晾干后反扣在载玻片上,镜检.

  5、计算:

  分裂指数=分裂细胞数/总细胞数×100%

互联网
仪器推荐
文章推荐