悬浮细胞传代比贴壁细胞传代稍微简单一些。由于细胞已经在生长培养基中悬浮，因此无需通过酶的作用使其从培养容器表面脱离，整个过程较为迅速，对细胞的损伤也较小。悬浮生长细胞的传代培养要比贴壁细胞简单得多，通常有两种方法。
1．直接给带传代的培养瓶中补充一定量的新鲜培养基，然后将进行分装。
2．先通过离心弃掉营养匮乏的旧培养基，然后再用适量的新鲜培养基重悬细胞沉淀，最后将其分装至培养瓶中即可。
悬浮细胞传代后的延滞期一般比贴壁细胞短。
所需材料
• 装有悬浮细胞的培养容器
• 完全生长培养基，预热至37℃
• 37℃培养箱，充有二氧化碳浓度为5%的湿化空气
悬浮细胞传代流程
所有与细胞接触的溶液和设备均应为无菌状态。必须采用正确的无菌技术，并且在超净台内进行。传代应在细胞处于对数期、未达到汇合状态时进行。达到汇合状态时，悬浮培养的细胞会聚集成团块，转动培养瓶时培养基会变得浑浊。传代前所建议的最大细胞密度随细胞系不同而有所差异；详细信息请参阅针对具体细胞的产品说明书或操作手册。
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