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美蓝浓度高和染色时间过长都会增加酵母菌的死亡，美兰有氧化性，浓度太高会使活菌很快致死，浓度低老龄细胞与活细胞不易区分；染色时间短，活细胞还没从蓝变无色，观察到的活细胞数量会比预计的少，染色时间长，活细胞数量也会减少。
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