革兰氏阳性菌是能够用革兰氏染色染成深蓝或紫色的细菌，相反革兰氏阴性菌不能被染色。它们细胞壁中含有较革兰氏阳性细菌大量的肽聚糖，但经常缺乏革兰氏阴性菌所拥有的第二层膜和脂多糖层。
革兰氏阳性菌包含细菌中的一个大门——厚壁菌门(Firmicutes)，包括一些著名的属，如芽孢杆菌(Bacillus)、李斯特氏菌(Listeria)、葡萄球菌(Staphylococcus)、链球菌(Streptococcus)、肠球菌(Enterococcus)和梭菌(Clostridium)。此外厚壁菌门还包括了柔膜菌纲(Mollicutes)，如支原体(Mycoplasma)，它们不能被革兰氏法染色，但与这些革兰氏阳性种类相关。
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