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末端转移酶的基本性状

2022.5.09
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zhaoqisun

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【性状】悬浮液,重组酶。末端转移酶(Terminal transferase,TdT)是一种无需模板的DNA聚合酶,催化脱氧核苷酸结合到DNA分子的3'羟基端。带有突出、凹陷或平滑末端的单双链DNA分子均可作为TdT的底物。一般操作是:先在载体上打开一单个位点,把它与末端转移酶和某一dNTP(如dATP)一起保温以使添尾,另一待插入的外源DNA片段则用互补的用同法添dNTP(dTTP)用同法添尾。接着使上述两种都接上互补单链尾的DNA片段彼此退火,使形成一杂合载体来转化受体菌。杂合载体中的裂隙或切口可被受体菌所修复。随酶提供10×反应缓冲液和25mMCoCl2。

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