α-半乳糖苷酶（α-galactosidase，α-gal，EC 3.2.1.22）是催化α-半乳糖苷键水解的一种外切糖苷酶，因能分解蜜二糖，又称蜜二糖酶，它能催化α-半乳糖苷键的水解。这一特点使得它可用于改善和消除饲料及豆制食品中的抗营养成分。此外，它在医学领域中能实现B→O血型转变、制备通用型血，以及在法布里病的酶替代治疗中也发挥了重要作用。α-半乳糖苷酶还可作用于含α-半乳糖苷键的复合多糖、糖蛋白和鞘糖。
某些α-半乳糖苷酶在底物浓度高度富集的情况下还具有转半乳糖基作用，利用这一特点可用于低聚糖的合成及制备环糊精衍生物。开发嗜中性或具pH 稳定性的α-半乳糖苷酶，寻找高产酶量的微生物或植物，成为近几年的研究热点。许多耐热α-半乳糖苷酶也因其特殊性逐渐引起了科学家们的广泛兴趣，期望利用其热稳定性在工业方面发挥更大的利用价值，以及在科技工艺和医药领域显示出更广阔的应用前景。
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