戊糖的含量测定

苔黑酚法

五碳糖，如木糖（植物纤维原料半纤维素戊糖的主要成分 ）、核糖，与浓盐酸共热时形成糠醛，在三氯化铁存在的条件下与苔黑酚煮沸时呈蓝绿色，在670nm测定吸光值，在一定的范围内显色程度与糖浓度成正比，以标准曲线法定量。 

二、试剂

（1）1g/L三氯化铁盐酸溶液称取0.1g三氯化铁，加入到100mL浓盐酸中。

（2）苔黑酚乙醇溶液1g苔黑酚（3，5-二硝基甲苯）溶于100mL95%乙醇溶液中。

（3）木糖标准溶液（100μg/mL）准确称取0.1g（精确至0.0001g）木糖溶于少量水中并定容至100mL。准确吸取上述溶液1mL稀释至10mL，此溶液每mL含100μg木糖。 

三、操作步骤

1. 标准曲线的制作

吸取100μg/mL木糖标准溶液0、0.1.0.2、0.3、0.4、0.6、0.8、1.0mL，分别置于10mL比色管中，用水补足到每管3mL，各管的木糖含量分别为0、10、20、30、40、60、80、100μg。各管分别加入1g/L三氯化铁盐酸溶液3mL，再加入苔黑酚乙醇溶液0.3mL，混合后放入沸水浴加热20min，立即放入流水中冷却，用水稀释定容至10mL。在670nm波长处测定吸光值。以木糖含量为横坐标，吸光值为纵坐标，绘制标准曲线或求得回归方程。

2.样品测定

取3mL待测样品（糖含量控制在10~100μg，其余操作与标准曲线相同，根据测定的吸光值查标准曲线或从回归方程中计算出含糖量。 

四、计算

式中 ：

C—从标准曲线中求得试样糖量，μg

3—吸取试样体积，mL

1000—μg换算成mg

本法对木糖的测定范围在10~100μg。测定时要严格控制反应条件，特别是反应时间，才能取得比较满意的效果。