动物消化实验中内源指示剂有哪些

动物消化实验中内源指示剂有哪些
　　一、化学分析法
　　化学分析法是指对饲料、动物组织及动物排泄物的化学成分进行分析测定，而主要是定量分析。化学分析法包括饲料分析、血液分析、尿液分析及粪便分析。通过有关化学成分的测定，可为动物营养物质需要量的确定和饲料营养价值的评定提供基础数据，为机体营养缺乏症的早期诊断提供重要的参数。
　　1．饲料分析
　　该方法是通过测定饲料中的概略养分含量和纯养分含量，来评定饲料的营养价值。饲料中的概略养分包括水分、粗蛋白质、粗脂肪、粗纤维、粗灰分和无氮浸出物，但这六种概略养分是一个笼统的概念，很难对饲料的营养价值作出较为准确的评判。对饲料中纯养分含量的分析测定是化学分析手段不断完善和发展的结果，也是营养学研究的必然需要。目前，我们可以测定的饲料纯养分包括：真蛋白质（TP）、NPN、AA、有效氨基酸、真脂肪、类脂肪、纤维素、半纤维素、木质素、糖、淀粉、各种矿物元素及维生素等。通过这些纯养分的含量高低并参考有关营养学理论，就可以比较准确地评定饲料的营养价值。通过饲料分析可对饲料的营养价值做出初步估计。
　　2．动物组织和血液分析

　　通过分析动物血液成分以及动物机体组织的相关指标来评价机体维生素、微量元素的吸收代谢情况，结合饲养试验、平衡试验和屠宰试验以确定动物对各种营养物质的需要。常用于测定的组织有肝、肾、骨骼肌、骨、毛发以及全血、血浆、血清和红细胞，甚至整个机体样品。
　　3．尿液分析

　　尿液中含有各种无机及有机成分，它们大多是动物新陈代谢的产物，虽然它们的含量受许多因素的影响，但正常情况下，各种成分都有一定的含量范围。通过某些尿液成分分析可了解体内代谢和机体营养状况是否正常。
　　4．粪便分析

　　粪便成分分析是消化试验和平衡试验的重要内容。通过测定粪便中的粗蛋白质、粗纤维和粗脂肪等养分的含量，来估计饲料中的各种可消化养分、消化能及代谢能含量的高低。
　　二、消化试验法

　　对饲料的化学分析只能说明饲料中各种养分的含量，而不能说明它们能被动物消化利用的程度或性质。只有测定饲料或日粮的养分消化率，才能比较准确的评定饲料营养价值。消化率的测定，必须通过消化试验完成。消化试验的内容如下：

　　（一）全收粪法

　　全收粪法是指收集动物的全部粪便进行消化试验，有肛门收粪法和回肠末端收粪法之分。前者是利用一定的装置（如集粪袋）在动物的肛门处收集动物粪便（一般选用公畜），然后进行处理。后者是通过外科手术在回肠末端安装一瘘管收集粪便，主要用于猪饲料氨基酸消化率的测定，从肛门收集的粪便，由于受大肠和盲肠微生物的干扰，所测结果与实际值相差较大。测定家禽氨基酸消化率，因禽类消化道短，大肠和盲肠微生物的影响小，一般仍采用全收粪法。
　　（二）指示剂法

　　指示剂法的优点在于减少收集全部粪便的麻烦，节省时间和劳力，用作指示剂的物质必须是不为动物所消化吸收、能均匀分布且有很高的回收率。指示剂又分为外源指示剂和内源指示剂。三氧化二铬（Cr2O3）常采用的外源指示剂。内源指示剂常用饲料本身含有的不可消化吸收的物质，如酸不溶灰分。养分消化率的计算公式为：
　　（三）尼龙袋法

　　尼龙袋法是将被测饲料装入一特制尼龙袋，从反刍动物的瘤胃瘘管放入瘤胃中，48h后取出，冲洗干净，烘干称重，与放入前的饲料蛋白质含量相比，差值为饲料可降解蛋白含量。目前国际上已普遍采用此法测定饲料蛋白质的降解率。其优点是简单易行，重现性好，试验期短，便于大批样品的研究和推广。需注意的是，尼龙袋的通透性要好，即网眼大小和密度要适当；样品要有一定细度，便于瘤胃液作用充分发酵。
　　（四）离体消化试验

　　离体消化试验是模拟消化道环境，在体外（试管内）进行的消化（孵化）试验。因常规消化试验和指示剂法都耗费大量人力、物力和时间，尼龙袋法虽有不少优点，但安装瘘管仍较麻烦，所以近年来离体消化试验发展迅速。按照消化液达到来源可分为消化道消化液法和人工消化液法。前者是收取瘤胃液或在离幽门1.5~2m处安装瘘管收集小肠液（PIF），然后在试管中消化。后者是采用人工制取的消化酶配制成模拟消化液。目前主要用于反刍动物饲料消化率以及瘤胃饲料蛋白质降解率的测定。