最好是24小时。
实验前将保存在-20℃的基质胶转移至4℃冰箱融化过夜，使用前用无血清培养基按培养基：基质胶=2:1的比例稀释；接种前将24孔板和Transwell小室用1×PBS浸泡5min湿润小室。用胰蛋白酶消化细胞后，用无血清培养液洗涤细胞，用含有1%FBS的培养基重悬细胞计数。培养24h后（侵袭实验培养48h后），每孔加入1mL4%溶液，室温固定10min；染色：吸去固定液，用1×PBS洗涤一次，每孔加入1mL0.5%结晶紫溶液，染色30min后用1×PBS洗三次，晾干；观察：用棉签小心擦去Transwell小室内没有迁移的细胞，置于200×显微镜下观察，计数每个视野中的细胞数。
将小室放入培养板时，要注意不要有气泡产生，因为一旦有气泡，下层培养液的趋化作用就减弱了。用棉签小心擦去Transwell小室内没有迁移的细胞时，不能碰到已经穿膜的细胞。难穿膜的细胞可以用无血清培养基饥饿处理12-24h。
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