1．病原体检查在一期梅毒的硬下疳部位取少许血清渗出液，放于玻片上，置暗视野显微镜下观察，依据螺旋体强折光性和运动方式进行判断，可以确诊。
2．梅毒血清学检查非梅毒螺旋体抗原血清试验是梅毒常规筛查方法，包括有性病研究实验室玻片试验（VDRL）、血清不加热反应素玻片试验(USR)、快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)。若VDRL、USR及RPR阳性，应做定量试验，最好能做梅毒螺旋体抗原血清试验，测定血清特异性抗体，常用方法有荧光密螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS)和梅毒螺旋体血凝试验(TPHA)。近年已开展用PCR技术取羊水检测螺旋体诊断先天霉毒。
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