胰岛B细胞的主要功能是分泌胰岛素。胰岛素与靶细胞表面的胰岛素受体结合，诱导细胞的代谢发生变化，使葡萄糖利用、储存过程加快，促使血糖浓度下降。胰岛B细胞分泌胰岛素的过程受到胞外多种信号的控制，其中较为重要的一种是血糖浓度对胰岛素分泌的调控。血液中的葡萄糖通过葡萄糖转运蛋白GLUT2转移入胰岛B细胞内，再通过代谢产生ATP。当血糖浓度上升时，转入胰岛B细胞的葡萄糖也增多，产生的ATP亦增多，诱导ATP敏感钾离子（K+）通道关闭，发生去极化反应。胰岛B细胞表面的电压敏感钙离子（Ca2+）通道会因此受到诱导而开放，钙离子进入胰岛B细胞内。钙离子进入胰岛B细胞后，会激活胰岛B细胞内的一种钙离子—钙调蛋白依赖性激酶，诱导胞内含有胰岛素的颗粒外排，促进胰岛素的释放。此外，乙酰胆碱等因子也可以影响胰岛素的分泌。
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