DNA凝胶回收试剂盒使用方法

1.在琼脂糖凝胶-EB电泳后，在紫外灯上小心的把所需的DNA片段切下，尽量去除多余的凝胶并尽量少带电泳缓冲液，称重，装入1.5 ml离心管。

2. 按照凝胶的重量近似的估计其体积，假设其密度为1g/ml，凝胶的体积可按如下方法计算：若凝胶薄片的重量为0.2 g，则其体积为0.2 ml。

3. 在上述离心管中加入3倍体积的Gel Buffer 1（如0.2 g胶，加入600ul Gel Buffer 1），颠倒混匀后放入50℃ 水浴锅中加热5~10 min。每隔2 min颠倒混匀一次。

4. 溶胶后，加入0.1倍Gel Buffer 1体积的Gel Buffer 2（如0.2 g胶，加入了600ul Gel Buffer 1， 再加入60ul Gel Buffer 2），混合均匀，此时溶液应为澄清黄色。

5. 待溶液冷却至室温，然后将溶液直接倒入吸附柱中， 13,000rpm室温离心30 s。

6. 再次将过柱液倒入吸附柱中，13,000rpm室温离心30 s，倒掉收集管中的液体。

7. 向吸附柱中加入500 μl Washing Buffer（确认已加入乙醇），13,000rpm室温离心30 s，弃收集管中废液。

8. 重复步骤7一次。

9. 将吸附柱重新放入套管中，再13,000rpm室温离心2 min。

10. 将吸附柱置于1.5 ml离心管上，静置2 min，使痕量乙醇完全挥发后加入20~30 μl Elution Buffer至管内柱面上，放置1分钟。

11. 13,000rpm室温离心2 min，所得液体即为回收的DNA溶液。