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什么是转录依赖的扩增系统?

2022.10.18
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zhaoqisun

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转录依赖的扩增系统(Transcript-basedamplification system,TAS),是Kwen等人于1989年研究报道的,主要用于扩增RNA.合成A、B引物,引物A的3‘末端与待扩增RNA互补,其5’端有T7RNA多聚酶的启动子信息.逆转录酶以A引物为起点合成cDNA;引物B与此cDNA3‘端互补合成cDNA第二链.逆转录酶除具有逆转录活性外,还有DNA多聚酶的活性及RNaseH的活性.

T7RNA多聚酶又以此双链DNA为模板.转录出与待扩增RNA一样的RNA,这些RNA又可作为下轮反应的模板.T7RNA多聚酶的催化效率很高,一个模板可转录10——103个RNA拷贝,因而反应液中待检RNA的数量以10的指数方式扩增.

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