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关于鬼笔环肽用作显影剂的介绍

2022.11.06
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coco5517

认真做好每一件喜欢的事,把每一件要做的事都变成喜欢并认真去做的事

  荧光鬼笔环肽(红色)标记内皮细胞中的肌动蛋白丝鬼笔环肽的特性使其成为研究F-肌动蛋白在细胞中分布的有用工具,方法是用荧光类似物标记鬼笔环肽并用它们对肌动蛋白丝染色以进行光学显微镜检查。鬼笔环肽的荧光衍生物在定位活细胞或固定细胞中的肌动蛋白丝以及体外观察单个肌动蛋白丝方面非常有用。开发了一种高分辨率技术,通过使用与荧光团曙红结合的鬼笔环肽(荧光素曙红)来检测光和电子显微镜下的F-肌动蛋白。在这种称为荧光光氧化的方法中,可以利用荧光分子来驱动二氨基联苯胺(DAB)的氧化,以生成反应产物,该产物可以使电子致密并可以通过电子显微镜检测。如果使用饱和量的鬼笔环肽,可视化的荧光量可以用作细胞中丝状肌动蛋白量的定量测量。因此,免疫荧光显微镜和显微注射鬼笔环肽可用于评估细胞质肌动蛋白在其聚合物形成的不同阶段的直接和间接功能。因此,荧光鬼笔环肽可以用作高分辨率研究肌动蛋白网络的重要工具。

  共聚焦显微镜拍摄的荧光鬼笔环肽染色的U2OS细胞的反卷积图像

  鬼笔环肽比通常用于标记细胞蛋白以进行荧光显微镜检查的抗体小得多,该抗体可以对丝状肌动蛋白进行更密集的标记,并且可以获取更详细的图像,尤其是在更高分辨率下。

  未经修饰的鬼笔环肽不会渗透细胞膜,因此在活细胞实验中效率较低。 已经合成了鬼笔环肽的衍生物,其细胞通透性大大提高。用鬼笔环肽处理的细胞具有多种毒性作用,并经常死亡。此外,重要的是要注意,用鬼笔环肽处理的细胞与其质膜相关的肌动蛋白水平更高,而将鬼笔环肽微注射入活细胞将改变肌动蛋白的分布以及细胞运动性。

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