利福平片－利福平－高效液相色谱法

方法名称：利福平片－利福平－高效液相色谱法

应用范围：该方法采用高效液相色谱法测定利福平片中利福平的含量。

该方法适用于利福平片。

方法原理：供试品经乙腈溶解并定量稀释，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长254nm处检测利福平的峰面积，计算出其含量。

试剂：1. 甲醇

2. 乙腈

3. 磷酸二氢钾溶液（0.075mol/L)

4. 枸橼酸溶液（1.0mol/L)

仪器设备：1. 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

辛基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按利福平峰计算应不低于1500。

1.3 紫外吸收检测器

2. 色谱条件

2.1 流动相：甲醇 乙腈 0.075mol/L磷酸二氢钾溶液 1.0mol/L枸橼酸溶液=30 30 36 4

2.2 检测波长：254nm

2.3 柱温：室温

试样制备：1. 对照品溶液的制备

精密称取利福平对照品适量，用乙腈溶解并定量稀释成每1mL中约含0.08mg的溶液，即为对照品溶液。

2. 供试品溶液的制备

取供试品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于利福平80mg），用乙腈溶解并定量稀释成每1mL中约含0.8mg的溶液，用0.45µm滤膜滤过，精密量取续滤液适量，用乙腈定量稀释成每1mL中约含0.08mg的溶液，即为供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

操作步骤：分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10mL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长254nm处测定利福平（C43H58N4O12）的峰面积，计算出其含量 。