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限制性核酸内切酶（restrictionendonuclease），又简称限制酶或内切酶。
它们是基因工程和基因诊断重要的一类工具酶。它们的发现和应用为从基因组中分离目的基因提供了必要的手段.限制酶能特异地识别和切割特异的核苷酸序列，将双链DNA切成较小的片段。
酶切后目的基因可能完整地或部分地保存于某一DNA片段上，并被分离出来。
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