取新鲜未开的花蕾用自来水冲洗10分钟，用75%的酒精消毒10-15分钟，无菌水冲洗2次，再用10%漂白粉上清液浸泡20分钟，无菌水冲洗3-4次。然后将花药放到加有基本培养基的小烧杯中，用注射器的内管在烧杯的壁上挤压花药，使花粉从花药中释放出来。用尼龙筛过滤掉药壁组滤液再经低速离心（100-160r/min)，上面的碎片可用吸管吸掉，再加入新鲜培养基。连续进行两次过滤，到每毫升含103-104个花粉的浓度就可以了。
简单的方法是花粉从花药中挤出后，用镊子取出花粉空壳，放在培养基上培养。此法适于微室栽培，但往往有药壁等体细胞混入。
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