器材及培养
材料和试剂
蒸馏水, 自来水, 取自儿童公园的湖水, 牛肉膏蛋白胨琼脂培养基.
仪器或其他用具
灭菌三角烧瓶, 灭菌带玻璃塞瓶, 灭菌培养皿, 灭菌吸管, 灭菌量筒.
研究方法
采用平板菌落记数技术测定水中细菌总数.
水样的采取
自来水
先将自来水水龙头用火焰灼烧3 min 灭菌, 再开放水龙头5 min 后, 以灭菌三角烧瓶接取水样, 以待分析.
公园的湖水
应取距水面10~ 15 cm 的深层水样, 先将灭菌的带玻璃塞瓶, 瓶口向下浸入水中, 然后翻过来, 除去玻璃
塞, 水即流入瓶中, 盛满后, 将瓶塞盖好, 再从水中取出, 最好立即检查, 否则需放入冰箱中保存.
细菌总数的测定
自来水
Step 1 用灭菌吸管吸取1 mL 水样, 注入灭菌培养皿中. 共做两个平皿.
Step 2 分别倾注约15 mL 已溶化并冷却到45 e 左右的肉膏蛋白胨琼脂培养基. 并立即在桌上做平面
旋摇, 使水样与培养基充分混匀.
Step 3 另取一个空的灭菌培养皿, 倾注肉膏蛋白胨琼脂培养基15 mL, 作对照.
Step 4 培养基凝固后, 倒置与37 e 温箱中, 培养24 h, 进行菌落记数.
公园的湖水
Step 1 稀释水样, 取三个灭菌空试管, 分别加入9 mL 灭菌水. 取1 mL 水样注入第一管9 mL 灭菌水
内, 摇匀, 再自第一管取1 mL 到下一管灭菌水内, 如此稀释到第三管, 稀释度分别为10- 1 , 10- 2 , 10- 3 .
Step 2 自最后三个稀释度的试管中各取1 mL 稀释水加入空的灭菌培养皿, 每一稀释度共做两个培养皿.
Step 3 各倾注15 mL 已溶化并冷却到45 e 左右的肉膏蛋白胨琼脂培养基并立即在桌上摇匀.
Step 4 凝固后倒置于37 e 恒温恒湿培养箱中培养24 h.
菌落记数方法
1) 计算相同稀释度的平均菌落数. 若有大片菌苔生长时, 弃用; 以无片菌苔生长的培养皿记数. 若片状菌
苔大小不到培养皿的一半, 其余一半分布均匀, 将此一半计数@ 2.
2) 选择平均菌落数在30~ 300 之间的平板. 只有一个符合此范围时, 以该平均菌落数@ 稀释倍数. 有两
个在30~ 300 之间时, 按两者菌落总数比值决定, 比值小于2, 取平均; 比值大于2, 取较小的菌落数.
3) 若所有稀释度的平均菌落数均大于300, 则应按稀释度最高的平均菌落数@ 稀释倍数.
4) 若所有稀释度的平均菌落数均小于30, 则按稀释度的平均数@ 倍数.
5) 若所有稀释度的平均菌落数均不在30~ 300 之间, 则以最近30 或300 的平均菌落数@ 稀释倍数.
微生物的含量能否反应水的营养化程度？
能
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