混合原则:a、优缺点互补;b、膨胀与收缩相互平衡;c、强氧化剂与还原剂应分别配置。
1、酒精-福尔马林液
70% 酒精 100 ml
福尔马林 2 -10 ml
固定植物一般组织,尤其用在柱头中的萌发花粉管的固定。固定后的材料,立即用作观察。通常固定24小时,可长久保存。
特点:不易收缩,常用于固定花粉管。
2、甲醛-醋酸-酒精液(FAA)
50% 或70% 酒精 9 0 ml
冰醋酸 5 ml
福尔马林 5 ml
这个固定液在植物研究上,应用最多,为植物组织最常用的固定液。固定时间,不受限制,短为24小时,长可延至数月或数年。野外工作,非常便利。并且固定的材料,不妨碍染色。可用以固定植物的一般组织,但用作细胞学上的固定,不如其他一些专用的固定剂。经此液固定后的材料,可不必洗涤,直接用70%酒精脱水。
特点:过去称“标准固定液”或“万能固定液”;是组织形态中常用的固定液;同时可兼做保存液。
3、酒精-冰醋酸液
其中常用为卡诺液(Carnoy)
纯酒精 15 ml
冰醋酸 5 ml
可用作植物组织及细胞的固定,通常固定2-24小时,视材料的大小而定。固定以后即用95%的酒精脱水;如用作细胞学上的涂片,固定后可直接回到70%酒精,然后进行操作。
特点:具强渗透力,作用迅速;常用于染色体压片法的固定。
4、铬酸-醋酸-福尔马林液
又名纳瓦兴液(Nawashin)。1912年首创。常用为冷多夫(Randoph)改良液。
分为甲乙两部分,用前等量混合。
此液在植物制片上应用甚广,是细胞学及组织学上一种优良的固定液。此液原来的配方已很少应用,现所用的都是改良液,且种类很多,如材料较柔嫩,含水量较多,可用配方I、Ⅱ;材料较坚硬,含水量较少,可用Ⅳ、V 配方,其中配方Ⅱ对植物胚胎学制片特别适用。为了使用方便,常分别配成甲、乙两种基液,用时临时等量配合。固定时间为12-24小时,固定后用70%酒精洗涤数次。
特点:渗透慢,不能长期保存;主要用于显示分裂相。
5、 精-醋酸-氯仿固定液(Carnoy fixative)
酒精 30毫升
氯仿 5毫升
冰醋酸 1毫升
可用作植物组织及细胞的固定,固定根尖和花药只需30-60分钟。不可在此液中放置太久(以不超过一天为宜)。
6、 福尔马林-丙酸-酒精液(Johansen fluid)
福尔马林 5毫升
丙酸 5毫升
50%酒精 90毫升
此液可用作固定一般植物组织。固定根尖细胞,用作染色体观察。通常固定24小时,也可长期保存。
7、 铬酸-醋酸固定液
三氧化铬 1克
冰醋酸 1毫升
蒸馏水 100毫升
用于容易渗透的材料,如丝状藻类、菌类、蕨类的原叶体等。固定12-24小时。此液不作保存液。
8、 铬酸-醋酸-福尔马林液(Licent fluid)
1%铬酸 80毫升
醋酸 5毫升
福尔马林 15毫升
固定液中包含氧化剂与还原剂,因此,此液用时需要临时配制。通常固定12-24小时。
9、 氯化汞-锇酸固定液(Bensley fixative)
2.5%氯化汞水溶液 4份
2%锇酸 1份
此液一般可用以固定线粒体,固定12-24小时,水洗。
10、 铬酸钾-福尔马林固定液(Regaud fixative)
3%重铬酸钾 80毫升
福尔马林 20毫升
固定高等植物生长点,用以观察细胞的结构,效果良好。在植物细胞学中多采用为叶绿体的固定液。此液氧化性很强,应用时,最好临时配制。固定2-12小时。